亚洲人成在线播放网站,成人在线免费观看视频,久久无码精品免费一区二区三区,热久久精品一区二区三区

當前位置: 首頁(yè) > 技術(shù)支持 > 常見(jiàn)問(wèn)題FAQ > ELISA試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題整理

瀏覽歷史

ELISA試劑盒常見(jiàn)問(wèn)題整理

1、1個(gè)96T試劑盒能測多少個(gè)樣?

1594889511202725.png



2、標準品500ml(96T/48T),能夠測多少次?

1)單標可以測四次

2)雙標可以測兩次


3、血液樣本如何選擇測ELISA?

1、血漿全血標本經(jīng)抗凝分離后去除血細胞成分即為血漿,主要化學(xué)成分測定和凝血項目檢測等。

2、血清是血液離休凝固后分離出來(lái)的液體,血清與血漿相比較,主要是缺乏纖維蛋白原,某些凝血因子也發(fā)生了變化。血清主要用于化學(xué)和免疫學(xué)等檢測。


說(shuō)明書(shū)上一般寫(xiě)血漿和血清都可以檢測,根據需要選擇,例如:纖維蛋白原檢測用血漿樣本,血清樣本檢測纖維蛋白原殘留。

來(lái)源:劉成玉. 臨床檢驗基礎[M]. 2005.P5


4、血液樣本發(fā)生溶血是否能檢測?

輕微溶血勉強可以檢測,明顯溶血建議重新取樣,溶血因紅細胞破壞溶解時(shí)釋放大量具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過(guò)氧化物酶為標記的ELISA,會(huì )導致非特異性顯色,干擾測定結果。

來(lái)源:

http://www.360doc.com/content/18/1207/05/52645714_799883575.shtml


5、組織樣本操作流程:

1) 組織樣本必須保持鮮重,如果是凍存的組織,應該室溫平行2小時(shí)以上,然后用生理鹽水沖洗干凈,再用濾紙把周?chē)乃治?,稱(chēng)重!組織重量不能低于50mg;

2)組織勻漿液選取是PBS(PH=7.2-7.4,濃度為0.01mol/L)勻漿的比例為1:10,相當于1g組織加9ml的勻漿液;

3)組織勻漿后,離心取上清,離心轉數為5000轉,但不能超過(guò)5000轉,時(shí)間為15分鐘;

4) 實(shí)驗中樣本提取的是200mg的樣本加1.8ml的勻漿液。


6、組織樣本操作中的常見(jiàn)問(wèn)題:

1)問(wèn):從各樣品中取了同樣大小的肉塊吧?具體是取了多少?怎么取的?稱(chēng)重方式嗎?之前好像提到過(guò)肉塊大小的尺寸,是不是用其他方式做到了各樣品的起始量的一致?

答:對于組織,不可能確定好每塊組織都達到恒定的重量,這個(gè)不太現實(shí)。都是按照固定的勻漿比例(勻漿比例為10%),相當于1g組織加9ml的勻漿液,重量小的,勻漿液也會(huì )少。最終的濃度是不變的!


2)問(wèn):測定樣品時(shí)需要將樣品制成液體樣本吧?請問(wèn)是如何做成液體樣品的?勻漿嗎?如果是勻漿方式的話(huà)應該有溶劑的,使用了哪些溶劑呢?

答:勻漿比例在上面已經(jīng)告訴了,勻漿液采用的是0.01mol的PBS(磷酸鹽緩沖液)PH控制在7.2-7.4。


7、ELISA試劑盒操作細節常見(jiàn)問(wèn)題整理:

1)問(wèn):是不是空白對照就是什么都不加?

答:不加樣本,不加樣本稀釋液,不加酶標試劑,其他都可以加。


2)問(wèn):樣本稀釋液是配好的嗎?

答:樣本稀釋液是配好的。


3)問(wèn):樣本稀釋液可以用來(lái)直接稀釋血清嗎?

答:可以的,直接加40ul就可以了。


4)問(wèn):洗滌液是濃縮的;是一次配好,還是現配現用?謝謝。

答:濃縮的,現配現用。


5)問(wèn):加入的顯色液A\B分別是什么物質(zhì)?作用原理?

答:顯色劑A和B,是經(jīng)典的TMB顯色系統。具體原理可以參考免疫方面的教科書(shū)。在這里不詳細列出。


6)問(wèn):終止液是什么物質(zhì)?如何做到終止反應的?

答:終止液是2mol的硫酸溶劑。終止反應也是和原理相關(guān)。這個(gè)參考教科書(shū)!


7)問(wèn):稀釋液是什么成分?

答:標準稀釋液是PBS(PH=7.2-7.4,濃度是0.01mol/L)。樣本稀釋液是含有0.5%BSA的PBS(PH=7.2-7.4,濃度是0.01mol/L)。


8)問(wèn):需要避光保存的試劑是哪個(gè)?

答:需要避光的是顯色液B。


9)問(wèn):試劑盒從冰箱取出后,室溫放置會(huì )影響其效果嗎?

答:試劑盒在做實(shí)驗前應該要室溫平衡一小時(shí)。短時(shí)間(3、4小時(shí))沒(méi)有任何影響。


10)問(wèn):樣品研磨后是立即離心,還是在4度冰箱里提取幾個(gè)小時(shí)以后再離心?

答:樣本研磨后立即離心即可。


補充:5%BSA 封閉液(Blocking Buffer)適用于 Western Blotting、ELISA 以及免疫組化實(shí)驗中非特異性蛋白結合位點(diǎn)的封閉。


8、樣本保存條件和時(shí)間怎么選擇?

1594889905203005.png

9、最后如果樣本數據沒(méi)有達到預期效果,不要慌,可以按下面流程排查問(wèn)題,或者聯(lián)系公司技術(shù)。

1594889976601683.png


呼伦贝尔市| 信阳市| 漳州市| 乐至县| 井冈山市| 广东省| 凌云县| 阿克苏市| 安徽省| 平安县| 进贤县| 如东县| 恩施市| 德保县| 云龙县| 湖口县| 阳春市| 阿鲁科尔沁旗| 屯昌县| 姚安县| 苗栗县| 绥中县| 仪征市| 青田县| 白城市| 固安县| 邓州市| 闽清县| 友谊县| 荣昌县| 蒲城县| 远安县| 衡阳市| 治多县| 邢台县| 大关县| 博客| 江源县| 阿拉善左旗| 贞丰县| 砀山县|